你是不是還在為轉染發(fā)愁？ 轉染效率一直不理想，按照說明書優(yōu)化了N次，Troubleshooting看了又看，轉染效率還是那么低，發(fā)綠光的細胞還是像星星之火一樣。 好不容易轉染進去了，可是轉染試劑毒性太大，細胞死大半了。唉，轉了等于沒轉。 換個病毒的方法吧，太麻煩，從構建質粒到生產病毒粒子，花了一個多月，而病毒粒子的滴度還是太低，感染不上，白搭。 現(xiàn)在，有了德國Amaxa公司的Nucleofector 核轉染技術，你終于不用再發(fā)愁了。 Nucleofector 技術是Amaxa公司的專利創(chuàng)新技術，它綜合應用傳統(tǒng)的電穿孔技術及細胞特異性的細胞核轉染液，通過調整優(yōu)化電轉參數(shù)（內存轉染程序），直接把外源基因導入原代細胞和傳代細胞的細胞核中。它不同于傳統(tǒng)的電穿孔儀，因為它可以把外源基因直接導入核中，而且細胞存活率遠遠高于電穿孔儀。德國Amaxa公司Nucleofector 細胞核轉染儀 Nucleofector 技術是德國Amaxa公司的專利創(chuàng)新技術，它綜合應用傳統(tǒng)的電穿孔技術及細胞特異性的細胞核轉染液，通過調整優(yōu)化電轉參數(shù)（內存轉染程序），直接把外源基因導入原代細胞和傳代細胞的細胞核中。 因此，Nucleofector 技術是獨一無二的，直接將基因轉染到細胞核內的高效非病毒轉染技術，可在數(shù)小時內完成整個轉染和分析的全過程。 NucleofectorTM技術簡介： 1. 非病毒轉染 NucleofectorTM技術是應轉染原代細胞和難轉染細胞系的需要而誕生的一種全新的轉染技術。它采用獨特的電場參數(shù)與細胞類型特異性的轉染溶液相結合的方法，將細胞轉染大大的提高；細胞的死亡率則大大的降低。2. DNA直接轉入細胞核內---不分裂細胞的理想選擇 不同于其它的非病毒轉染，NucleofectorTM技術直接將DNA轉到細胞核內。因此，使用NucleofectorTM技術轉染細胞不再依賴細胞分裂，甚至于不分裂的細胞。3. 從轉染到蛋白質表達僅需要幾小時 DNA是直接轉入細胞核內的，因此，轉染后幾小時就可以檢測到蛋白質的表達。多數(shù)細胞轉染2-4小時后就能檢測到基因表達。一、Nucleofector轉染操作步驟：Nucleofector細胞核轉染儀的整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。第1步：處理細胞，精確計數(shù)第2步：混合DNA、轉染液，重懸細胞，加入轉染杯第3步：將轉染杯放入轉染儀，按鍵選擇相應程序，按 start 鍵開始轉染，10秒鐘左右。第4步：取出細胞繼續(xù)培養(yǎng)二、Nucleofector轉染技術的突出特點：(1)轉染高(2)轉染速度快 由于基因轉染不依賴細胞分裂，在大多數(shù)細胞類型轉染地基因2-4小時就能檢測表達，大大縮短了傳統(tǒng)轉染方法必須24-48小時才能表達地時間。這樣加快了實驗進程（1天即可完成）。(3)操作簡單方便Nucleofector轉染技術操作不到1小時就能完成。三、Nucleofector核轉染試劑盒成分：a，細胞特異性細胞核轉染液b，電轉杯c，專用細胞轉移tipd，專利的pmaxGFP報告質粒四、NucleofectorTM 技術技術參數(shù)Cat.No:AAD-1001S 體 積 30 23 11cm 重 量 2.6kg 供應電 源 230VAC+10%/-20% 頻 率 50-60Hz 消耗電 源 16VA/fuse0.315A 電源保護級別 I級 注：德國Amaxa公司已經被世界著名的大公司LONZA收購！六、NucleofectorTM 技術的應用1、RNAi與NucleofectorTM技術2、免疫學/血液學研究 使用NucleofectorTM技術，質粒DNA或寡核苷酸可以有效的直接轉入新鮮分離的早期或刺激的人T、B細胞、樹突狀細胞、CD34+細胞。單核細胞、巨噬細胞或朗格罕氏細胞的實驗方案正在研制過程中。 3、心血管研究 到目前為止，轉染內皮細胞如HUVEC（HumanUmbilicalVeinEndothelialCells）或人MVEC（MicrovascularEndothelialCells）已經可以實現(xiàn)。但是，繁瑣的優(yōu)化步驟及缺乏可重復性等因素一直制約著這些細胞的轉染。使用NucleofectorTM技術轉染這些細胞，簡單且重復性好。4、皮膚醫(yī)學和組織工程 NucleofectorTM技術直接將DNA轉入細胞核內，對原代細胞可以得到幾乎完美轉染，如人真皮纖維原細胞和人表皮黑素細胞。5、腫瘤研究 惡性癌變總是基因紊亂導致的不可調控的細胞無限生長。近幾十年來，基因轉移已經成為揭示這一過程的重要手段。6、神經生物學研究 應用NucleofectorTM技術，質?；蚬押塑账峥梢杂行У剞D染到原代神經細胞和細胞系中，轉染后幾小時就可以檢測到蛋白質的表達。更重要的是，蛋白質表達的水平可以通過轉入DNA量進行調控。7、干細胞研究 骨髓基質來源的MSC可以分化為多種細胞，如造骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞或腱細胞，MSC這些潛在的分化能力賦予其在組織工程學研究中廣泛的前景。8、其它細胞系轉染 NucleofectorTM技術的使用者已經對下列細胞系進行了成功轉染，如您的工作需要進行以下細胞系的轉染。細胞轉染效率細胞轉染效率HumanBcells36%Humankeratinocytes46%HumanMSC47%Humandendriticcells49%HUVEC50%HMVEC-L52%Ratneurons,hippocampal54%HCAEC57%Mouseneurons58%Ratneurons,cortical59%Humanchondrocytes65%HumanTcells66%HumanAoSMC68%NHEM-Neo70%CD34+71%Humandermalfibroblasts89%表1原代細胞的轉染效率 4D-Nucleofector System最新產品